无菌室内的地面、墙壁必须平整，不易藏污纳垢，便于清洗。工作台的台面应该处于水平状态。无菌室和缓冲间都装有紫外线灯，无菌室的紫外线灯距离工作台面 1 米。工作人员进入无菌室应穿灭过菌的服装，戴帽子。

在获得了无菌环境和无菌材料后，还要保持无菌状态，才能对某种特定的已知微生物进行研究或利用它们的功能，否则外界的各种微生物很容易混入。外界不相干的微生物混入的现象，在微生物学中叫做污染杂菌。

无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照30分钟以上，并且同时打开超净台进行吹风。操作完毕，应及时清理无菌室，再用紫外灯辐照30分钟。 供试品在检查前，应保持外包装完整，不得开启，以防污染。检查前，用75%的酒精棉球外表面。 每次操作过程中，均应做阴性对照，以检查无菌操作的可靠性。 吸取菌液时，必须用吸耳球吸取，切勿直接用口接触吸管。 接种针每次使用前后，必须通过火焰灼烧，待冷却后，方可接种培养物。 带有菌液的吸管，试管，培养皿等器皿应浸泡在盛有5%来苏尔溶液的桶内，24小时后取出冲洗。 凡带有活菌的物品，必须经后，才能在水下冲洗，严禁污染下水道。

准备工作 1． 先进行无菌室空间的，开启紫外灯30—60分钟 2． 检验用的有关器材， 搬入无菌室前必须分别进会 3． 操作人员必须将手清洗，穿戴好无菌工作衣、帽和鞋，才能进入无菌室 4． 进入无菌室后再一次手部，然后才进行检验操作